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BsaI, ADCF 经过基因工程重组、能够在 5~15分钟内精确完成DNA 切割,适用于质粒 DNA、PCR产物或基因组 DNA 等的快速酶切。BsaI, ADCF 具有如下特点:5~15分钟内即可完成酶切;良好的酶活冗余度,轻松应对底物过量或困难模板酶切。上海惠诚生物提供的重组BsaI限制性内切酶不含动物源性相关组分。
Cat.No.: E21502H
产品名称:
重组BsaI限制性内切酶,无动物源
英文名称:
BsaI, ADCF
产品组成:
组分 | 规格 |
BsaI, ADCF | 10000 U (100 U/μl) |
10× BsaI Buffer | 8×1.25 ml |
识别位点:
5'...G G T C T C (N)₁ ↓...3'
3'...C C A G A G (N)₅ ↑...5'
建议反应条件:
1× 酶切Buffe; 37℃温育。
最适反应温度:
37℃
失活条件:
80℃ 温育 20 min。
反应时间:
可在 5~15 min 内完成反应
保存条件:
-20 ℃保存
用途:
质粒 DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。
使用方法:
DNA 快速酶切流程
① 在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系:
a. 本体系适用于经过纯化的 PCR 产物酶切。未纯化的 PCR 产物具备一定的离子强度,10×Buffer 加入量可适当减少至 2 μl。但由于 DNA 聚合酶同时具有 外切酶活性,会影响酶切产物,因此如下一步需进行克隆等操作,建议酶切前对 PCR 产物进行纯化。
② 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴;
③ 37℃温育 15 min(质粒),或 15~30 min(PCR 产物),或 30~60 min(基因组 DNA);
④ 80℃温育 20 min 即可使酶失活,停止反应(可选)。
2. 双酶切或多酶切
① 每种快速内切酶的用量为 1 μl,并根据需要适当扩大反应体系;
② 所有快速内切酶的体积总和不得超过总反应体系的 1/10;
③ 如果所用的几种快速内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,在其最适反应温度下进行酶切 反应。
3. 适用于质粒的扩大反应体系
不同 DNA 中的酶切位点数量:
甲基化修饰影响:
在不同反应缓冲液中的活性:
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